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免疫检测,你只知道ELISA?带你认识DELFIA技术!

作者:无锡耐思生命科技股份有限公司 2023-06-16T15:11 (访问量:6699)


你只知道ELISA?



在生命科学领域多种情况下,及时、高效、经济地测定和量化样品中存在的抗原或抗体是至关重要的环节。

酶联免疫吸附实验(ELISA)已被证明是非常宝贵的研究和诊断工具, 通过将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶(主要是HRP)标记的抗原抗体反应在固相表面,从而测量生物样品中的抗体或抗原。

ELISA原理示意图

传统ELISA避免了同位素的使用,消除了安全性的隐患,但外部条件对溶液颜色变化的影响巨大且OD值有效的线性范围过低,ELISA检测的灵敏度和动态范围大大受制于光吸收技术的缺陷。


高灵敏度荧光ELISA——荧光时代

1982年Halonen等人在J Clin Microbiol杂志上发表了题为” Time-resolved fluoroimmunoassay: a new test for rubella antibodies” 的文章,标志着免疫检测正式跨入荧光时代,这也是DELFIA技术的原型。

简单来说,DELFIA相比传统ELISA实验有两个区别:

1. 检测抗体上的酶HRP换成镧系螯合物((Eu, Sm, Tb, Dy)标记。

2. 检测方式为荧光检测。

DELFIA原理示意图

DELFIA中用到的镧系元素是一类特殊的具有荧光性质的元素,这对实验材料——酶标板提出了要求。

绝大多数ELISA都选择透明酶标板作为作为载体和容器,但发光反应中发射出的光是各向同性的,光不仅会从垂直方向发散,还从水平方向发散出来,很容易的就会通过透明酶标板各个孔之间的间隙和孔壁。相邻孔之间相互影响,造成结果失误。


黑白两色酶标板更适用于发光检测



白色的酶标板可用于较弱的光检测,常用于一般的化学发光和底物显色(如双荧光素酶报告基因分析)。

黑色的酶标板因其自身会有光吸收,其信号要弱于白色的酶标板,一般用于检测较强的光,如荧光检测。

产品详情


产品优势

Ø 高结合力

耐思黑色酶标板由非自荧光材料制成,表面经处理后,其蛋白结合能力大大增强,可达500ng IgG/cm2,主要结合的蛋白分子量>10kD。


Ø 背景荧光低,可消除非特异反应带来的问题。

黑色的酶标板因其自身会有光吸收,可排除一些较弱的背景干扰荧光。


Ø 可拆式设计

白色酶标板框搭配黑色酶标板条的可拆式设计更便于操作。

拆装动作



当需要将板条拆下时,可从板条正面两端轻轻向上掰动,然后抠取下来,如上图所示。

若板条太紧难以掰动,可用手指抵住板条底部轻轻向上顶,然后如上图将板条抠取下来。

务必要戴好无尘手套,以免污染板条而影响板条的透光性。


不可从板条的一端强行掰取,容易造成板条断裂。


在装板条时,要注意方向,板条两端分别设计成方形和半圆形,半圆形那端必须装在有凸起台阶的卡槽内(箭头所在处),切勿装反。



将板条装入板框后,在两侧和中间部位都需要进行按压,压实后方可进行后续实验。

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