Elisa试验操作中可能影响结果的原因及解决办法-分析方法-资讯-生物在线

Elisa试验操作中可能影响结果的原因及解决办法

作者:上海远慕生物科技有限公司 2016-03-22T00:00 (访问量:2586)

    Elisa试验操作中可能影响结果的原因及解决办法

    远慕生物技术专家讲述:ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床上得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。

    下面分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法

    1.选择试剂

    选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。

    2加样

    可能原因:①血清或血浆标本分离不好即进行加样;②手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时);③加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。解决办法:①标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。②加样后及时放入孵箱。③加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。④如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。⑤标本较多时,请分批操作。

    3.孵育

    可能原因:①孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗彻底;②孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。解决办法:①贴封片或加盖;②按说明步骤严格控制操作时间。

    4.洗板

    可能原因:①采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。②采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不彻底;洗板针堵塞,抽吸不完全;洗板不畅,导致洗板效果差。③反应板过多造成洗板等待时间长。解决办法:①保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;②合理安排,或多用几台洗板机。ELISA试剂盒

    5.显色

    可能原因:①显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;②加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:①显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用;②加样时保持显色剂不外流;③A、B液应避免接触金属器械。ELISA试剂盒

    6.终止

    可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。

    7.读板

    如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。

    所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次**;尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。

    在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。

上海远慕生物科技有限公司 商家主页

地 址: 上海浦东新区川沙经济园区

联系人: 俞燕熙

电 话: 021-58999639

传 真: 021-50760790

Email:m13310162040@163.com

相关咨询

各种生化分析检验系统介绍 (2017-05-08T11:28 浏览数:8070)

支原体染色检测试剂盒 (2017-01-06T16:26 浏览数:7283)

ELISA产品会出现的问题及解决办法 (2016-12-21T16:14 浏览数:6495)

远慕告知您ELISA最基本的操作原理! (2016-12-07T15:10 浏览数:12938)

远慕ELISA试剂盒实验原理和操作注意事项 (2016-10-26T16:22 浏览数:12759)

远慕生物介绍:常用电泳试剂 (2016-10-11T11:06 浏览数:6295)

远慕生物-鸡免疫球蛋白G试剂盒 (2016-09-23T09:39 浏览数:6322)

上海远慕:印度墨汁 (2016-09-07T10:20 浏览数:6988)

单细胞凝胶电泳标准操作 (2016-08-22T16:02 浏览数:12765)

胎牛血清质量该怎样辨别?看颜色就知道嘛? (2016-09-09T10:19 浏览数:8165)

ADVERTISEMENT