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钙黄绿素是一种激发光波长在495nm处,发射光波长在515nm处的钙离子荧光指示剂。,因为它的细胞毒性很低,所以钙黄绿素常作为荧光探针去染活细胞的。
钙黄绿素溶液配制
称取0.2g射香草酚酞,1g钙黄绿素及100g氯化钾在玻璃研钵中研细混匀。
钙黄绿素溶液染色原理
钙黄绿素在其浓度大于100 mM时,钙黄绿色荧光自我淬灭。它常被用做络合物指示剂,用来滴定EDTA螯合的钙离子,并且用荧光检测法测定钙离子浓度。它具有非常好的水溶性,其质子 解离常数(酸度系数)pKa1=2。1, pKa2=2。9, pKa3=4。2, pKa4=5。5, pKa5=10。8和pKa6=11。7。Calcein-AM是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂,Calcein-AM由于在 Calcein(钙黄绿素)的基础上加强了疏水性,因此能够轻易穿透活细胞膜。当其进入到细胞质后,酯酶会将其水解为Calcein(钙黄绿素)留在细胞 内,发出强绿色荧光。
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