Elisa试剂盒双位点一步法的原理、应用于注意事项
【上海品牌供应商—上海岚兴生物提供，此文仅供参考】
双位点一步法的原理
Elisa试剂盒双位点一步法应用识别抗原不同位点2个单克隆抗体（McAb）作双抗体夹心法测定。包被一个McAb后，同时加入待检抗原和另一个McAb酶标物，待检抗原上的2个抗原决定簇同时与固相McAb和酶标McAb结合，形成固相McAb-待检抗原-酶标McAb复合物，加底物通过显色反应进行测定。
双位点一步法的操作步骤
1、将1个McAb与固相载体连接，形成固相McAb。洗涤除去未结合物。
2、同时加入待检标本和酶标McAb，温育，是待检抗原和固相McAb及酶标McAb反应形成双抗体夹心复合物。洗涤除去未结合物。
3、加底物显色。
双位点一步法的应用
适用于双抗体夹心法的Elisa试剂盒，有些也可用双位点一步法检测。如HBsAg同样可用此法进行检测，其原理为：将纯化的抗HBs吸附于固相载体表面，加入待检血清（或血浆），同时加入辣根过氧化物酶标记的另一个抗HBs（酶结合物），如血清或血浆中含有HBsAg，则通过温育形成固相McAb-HBsAg-酶标McAb复合物，加入底物，通过显色反应进行测定。若血清或血浆中不含HBsAg，通过洗涤除去未结合物，加底物后就不显色。
双位点一步法的评价
由于应用McAb，双位点一步法具有很高特异性，一步法省时、简便。
当待检抗原浓度过高时，大量过剩抗原分别饱和固相McAb和酶标McAb而抑制夹心复合物的形成，这种现象称为钩状效应（hook effect），可出现假阴性结果。可将待检标本稀释后再做或提高抗体试剂的亲和力、浓度、纯度定以消除钩状效应。
Elisa试剂盒双位点一步法的原理、应用于注意事项
作者：上海岚兴生物科技有限公司 2016-08-11T00:00 (访问量:9952)
上海岚兴生物科技有限公司 商家主页
地 址： 上海市奉贤区奉柘公路2799号
联系人： 张经理
电 话： 021-57503059
传 真： 021-57503059
Email：15221507100@126.com
相关咨询
高纯水、超纯水、去离子水、纯水、蒸馏水的区别 (2017-01-03T12:55 浏览数:4513)
蛋白marker发展史 (2016-12-27T15:06 浏览数:5200)
DMEM培养基的成份 (2016-12-20T10:21 浏览数:9046)
靶向药物治疗不容乐观，仅适合1/3肿瘤患者 (2016-12-15T14:18 浏览数:2811)
淋巴细胞的分离和激化实验 (2016-12-09T09:45 浏览数:2642)
果蔬维生素C含量的测定及分析 (2016-11-25T16:54 浏览数:2567)
常用的刚果红培养基，你知道属于哪一类培养基吗？ (2016-11-14T09:36 浏览数:8729)
Hoechst染色方法 (2016-11-04T15:07 浏览数:3494)
一种新的结直肠癌个体化CSN6分子标志物作用机制研究 (2016-09-26T11:20 浏览数:1895)
卡拉胶的分类及详细介绍 (2016-08-25T13:35 浏览数:3205)
ADVERTISEMENT