产品名称：CVT琼脂
产品应用：用于乳制品中嗜冷菌的计数
  培养基的保质期各不相同。不同的标准中均有明确规定了保存的条件和保质期。培养基应保存在防止其成分发生变化的环境下，即应避光、干燥保存；如有必要，用保存于2℃～8℃冰箱中，或依据培养基要求的储存条件进行保存。除标准规定或保质期验证实验的结果表明有较长的保质期外，通常平板保存不超过2周～4周，三角瓶和试管的保存不超过3个月～6个月。除标准规定或保质期验证实验的结果表明有较长的保质期外，含有不稳定添加成分的培养基应即配即用。对发生化学反应或含有不稳定物质的固体培养基也应即配即用，不可二次融化。
CVT琼脂，实验室应对贮存培养基的有效期进行规定。观察培养基颜色变化，是否有蒸发/脱水情况，是否有微生物生长。当培养基发生这类变化时，应停止使用。在使用和进一步加热前，应事先将培养基放置到室温。
正确制备培养基是微生物检验的最基础步骤之一。使用脱水培养基和其他成分，尤其是含有有毒物质（如胆盐或其他选择剂）的成分时，应遵守良好实验室规范和生产厂商提供的使用说明。培养基的不正确制备会导致培养基出现质量问题。
  使用商品化脱水合成培养基制备培养基时，应严格按照厂商提供的使用说明配置。记录所有相关数据，如质量/体积、pH、制备日期、灭菌条件和制备人员等。
  使用各别成分制备培养基时，应按照配方准确配制，记录所有细节信息，如：培养基名称和类型及试剂级别、每个成分物质含量、制造商、批号、pH、培养基体积（分装体积）、无菌措施（包括实施的方式、温度及时间）、配置日期、人员等，以便溯源。
CVT琼脂，将培养基放到沸水浴中或采用其他有相同效果的方法（如高压锅中的蒸汽）融化。经过高压灭菌的培养基尽量减少重新加热的时间，避免过度加热。培养基融化后立即移开，室温静置片刻（约2min)，以免玻璃容器发生破裂。
  融化后的培养基放人47℃～50℃恒温水浴锅中保温，冷却到47℃～50℃所需的时间取决于培养基的类型、体积和在水在锅里的分装量。融化后的培养基应尽快使用，放置时间一般不超过4h。剩余的培养基凝固后不得再次融化使用。特别是灵敏性培养基，应根据相关标准，缩短融化后放置的时间。
  将琼脂培养基倒人类似检测培养基使用的独立容器中，插入温度计，记录并保存琼脂的融化、温度。加入样品的培养基应将温度调节到44℃～47℃，或按照相关标准调节温度。
对分离和计数培养基而言，至少应进行半定量测试。对于鉴别培养基而言，只需进行定性测试。定量测试对培养基的质量有更高的保证。
CVT琼脂，不含指示剂和选择剂的培养基，只需用阳性测试菌株进行检测。含有指示剂和选择剂的培养基，应使用能证明其指示和选择功能的菌株进行检测。
1.以无菌操作方式开启冻干菌种管，加入适量培养液（按菌种选择培养液，如细菌选择营养肉汤、白色念珠菌选择沙堡液体培养基、分枝杆菌选择苏通综合液体培养基、黑曲霉菌选择麦芽浸膏营养肉汤培养基），吹吸数次，使菌种融化分散。取含5.0 mL～10.0 mL相应培养液的试管，滴入少许菌种悬液，在适宜温度下培养至规定时间（一般为36 ℃±1 ℃培养18 h～24 h、黑曲霉菌为30 ℃± 1℃培养42 h～48 h），此为第1代培养物。
  2.用接种环取第1代培养物，或从菌种冻存管中取适量菌液/瓷珠，划线接种于相应培养基平板（按菌种选择培养基，如细菌选择营养琼脂培养基、白色念珠菌选择沙堡琼脂培养基、分枝杆菌选择改良罗氏培养基或其他商品化分枝杆菌专用复合琼脂培养基、黑曲霉菌选择麦芽浸膏琼脂培养基），在适宜温度下培养至规定时间（一般为36 ℃±1 ℃培养18 h～24 h、分枝杆菌36 ℃± 1℃培养72 h、黑曲霉菌30 ℃±1 ℃培养42 h～48 h），此为第2代培养物。
  3.挑取第2代培养物中典型菌落，接种于相应培养基斜面或平板（按菌种选择培养基斜面，如细菌选择营养琼脂斜面、白色念珠菌选择沙堡琼脂斜面、分枝杆菌选择改良罗氏培养基或其他商品化分枝杆菌专用复合琼脂斜面、黑曲霉菌选择麦芽浸膏琼脂培养基平板），在适宜温度下培养至规定时间（一般为36 ℃±1 ℃培养18 h～24 h、分枝杆菌36 ℃±1 ℃培养72 h、黑曲霉菌30 ℃±1 ℃培养42 h～48 h），此为第3代培养物。
  4.取第3代培养物，接种于相应培养基斜面，在适宜温度下培养至规定时间，此为第4代培养物。5.1.5 按上述方法培养至所需代数，传代时在试管上注?菌种名称、菌种号、代数及传代日期等基本信息。
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