总抗氧化能力测定试剂盒-常用生化试剂-试剂-生物在线
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总抗氧化能力测定试剂盒

总抗氧化能力测定试剂盒

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产品名称: 总抗氧化能力测定试剂盒

英文名称: Total Antioxidant Capacity(T-AOC) Assay Kit

产品编号: BC1310

产品价格: 0

产品产地: 北京市通州区马驹桥联东U谷85A三

品牌商标: Solarbio

更新时间: 2024-12-23T13:59:44

使用范围: null

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产品内容:

提取液:液体60mL×1瓶,使用前预冷。

试剂一:液体50mL×1瓶,避光保存。

试剂二:液体5mL×1瓶,4℃避光保存。

试剂三:液体5mL×1瓶,避光保存。

 

产品说明: 

测定对象中各种抗氧化物质和抗氧化酶等构成总抗氧化水平。在生物学、医学和药学研究中常 常检测血浆、血清、唾液、尿液等各种体液,细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液及各种抗 氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力。 在酸性环境下,物质还原Fe3+-三吡啶三吖嗪(Fe3+-TPTZ)产生蓝色的Fe2+-TPTZ的能力反映了 其总抗氧化能力。

 

自备实验用品 可见分光光度计、恒温水浴锅、低温离心机、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。

 

 操作步骤:

一、 样品的制备

(1) 血清、血浆、唾液或尿液样品 血浆(制备时可以使用肝素或柠檬酸钠抗凝,不宜使用EDTA抗凝)4℃,5000rpm 离心10min, 取上清待测。血清、唾液或尿液样品直接用于测定,也可以-80℃冻存(不宜超过30 d)后再测定。

(2) 组织样品 按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取 液)进行冰浴匀浆,然后10000g,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

(3) 细胞样品 按照细胞数量(10 4个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎(功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);10000g,4℃离心 10min, 取上清,置冰上待测。

 

二、 测定操作

混合液(现配现用):将试剂一、试剂二、试剂三按 10:1:1 的比例混合,使用前预温至 37℃。

 

对照管

测定管

混合液(μL)

900

900

样本(μL)

 

30

双蒸水(μL)

120

90

充分混匀,反应 10min,双蒸水调零,1mL 玻璃比色皿,测定 593nm 处吸光值, △A= A 测定-A 空白

 

注意:空白管只需测定一次

 

三、 总抗氧化能力计算: 

1. 定义:样品的抗氧化能力以达到同样吸光度变化值(△A)所需的标准液离子浓度表示。 标准曲线为y=0.6308 x +0.1291,R2=0.9989

2. 计算公式:

(1) 按蛋白浓度计算

总抗氧化能力(U/mg prot)=1/ 0. 6308×(△A-0.1291)× V反总÷(V样× Cpr) =53.9×(△A-0.1291)÷ Cpr

(2) 按样品质量计算

总抗氧化能力(U/g)=1/ 0. 6308 ×(△A-0.1291)× V反总÷(V样÷V样总×W) =53.9×(△A-0.1291)÷ W

(3) 按细胞数量计算

总抗氧化能力(U/10 4cell)= 1/ 0. 6308×(△A-0.1291)×V反总÷V样×V样总÷细胞数量(万个) = 53.9×(△A-0.1291)÷ 细胞数量(万个)

按液体体积计算

总抗氧化能力(U/mL)= 1/ 0. 6308×(△A-0.1291)× V反总÷V样 =53.9×(△A-0.1291)÷ Cpr V 样总:加入提取液体积,1 mL;

V 反总:反应总体积,1.02mL;V 样:反应中样品体积, 0.03mL;W:样品质量,g;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL

 

注意事项: 

1. 试剂二对人体有刺激性,请采取适当的防护措施。为了您的安全和健康,请穿实验服并戴乳胶 手套操作。

2. 尽量避免使用在酸性条件下呈蓝色或接近蓝色的试剂,否则对本试剂盒的检测结果产生干扰。

3. 样品中不宜添加Tween、Triton和NP-40等去垢剂和DTT、巯基乙醇等影响氧化还原反应的还原剂。

4. 如果样品测定出来的吸光值在标准曲线范围以外,需把样品适当稀释或浓缩后再进行测定。

5. 试剂盒 2-8℃保存。

相关文献:

《A C2H2 zinc-finger protein OsZFP213 interacts with OsMAPK3 to enhance salt tolerance in rice》 作者:Z Zhang, H Liu, C Sun, Q Ma, H Bu, K Chong 期刊:Journal of plant Physiology 影响因子:7.394 PMID:30055519
《Alleviation of reactive oxygen species enhances PUFA accumulation in Schizochytrium sp. through regulating genes involved in lipid metabolism》 作者:Sai Zhang,Yaodong He,Biswarup Sen,Xiaohong Chen,Yunxuan Xie,Jay D.Keasling,Guangyi Wang 期刊:Metabolic Engineering Communications 影响因子: PMID:29896446
《Evaluation of Oxidative Stress Status in Aged Human in relation to some Diseases》 作者:Esmail S. Kakey and Amez A. Ismael 期刊:International Conference on Pure and Applied Sciences 影响因子: PMID:
《Wild Lonicera caerulea berry polyphenol extract reduces cholesterol accumulation and enhances antioxidant capacity in vitro and in vivo》 作者:Suwen Liu,Lu You ,Yuhua Zhao,Xuedong Chang 期刊:Food Research International 影响因子:3.579 PMID:29580541