CRISPR/Cas9定点插入细胞系的构建
根据给定GeneID或DNA序列，需要插入的DNA序列，以及插入位置。在插入位置位置附近设计3个sgRNA以及donor并构建载体、转染细胞、单克隆的分选。最终通过测序验证是否得到插入的细胞系。
Cas9慢病毒包装
构建慢病毒Cas9表达体系可以有效的将Cas9转入细胞，并高效表达。为第二步转入识别靶点的gRNA筛选阳性细胞的抗性基因或荧光基因，用于同源重组模板，降低了难度。
CRISPR/Cas9定点插入细胞系的构建
根据给定GeneID或DNA序列，需要插入的DNA序列，以及插入位置。在插入位置位置附近设计3个sgRNA以及donor并构建载体、转染细胞、单克隆的分选。最终通过测序验证是否得到插入的细胞系。
Cas9慢病毒包装
构建慢病毒Cas9表达体系可以有效的将Cas9转入细胞，并高效表达。为第二步转入识别靶点的gRNA筛选阳性细胞的抗性基因或荧光基因，用于同源重组模板，降低了难度。