副伤寒杆菌（Sp） IgG 抗体试剂盒（酶联免疫法）

使 用 说 明(96T/48T)

作者： 江彬

Tel : 1991-4747-194

[用途]

本试剂盒用于定性检测人血清/血浆中的副伤寒沙门氏菌（Sp）IgG抗体，对伤寒杆菌感染的流行病学调查和追踪传染源有重要的价值；操作优于肥达氏反应，简便、快速、灵敏。

[原理]

本试剂盒采用亲和素-生物素化Sp-抗原(A、B、C)预包被板ELISA 原理，检测人血清/血浆中存在的 Sp- IgG 抗体，并配以酶标记抗人IgG（h+l链）单克隆抗体作为标记物。加入底物TMB显色后终止反应，在450nm波长测各孔O.D值，O.D值的大小与待检抗体含量成正比。生物素系统（biotin-avidin system）的稳固级联放大作用，使试剂的特异性、灵敏度、稳定性极大地提高。

[试剂盒组成]

1、生物素化抗原预包被板 1块（8X12/4X12） 2、阴性对照血清 1瓶

3、阳性对照血清 1瓶

4、标本稀释液 1瓶（20 ml/10ml）

5、酶结合物 1瓶（10ml/5ml）

6、30X浓缩洗液

1瓶（20ml/10ml，加蒸馏水1：30稀释使用）

7、显示剂A、B液 各1瓶（6ml/3ml）

8、终止液（2M H₂SO₄） 1瓶（6ml/3ml）

9、说明书 1份

[操作步骤]

1． 将试剂盒平衡至室温后取出反应板拆封后置于板架上。

2． 样本稀释：用标本稀释液以1：101（2ul—200ul）

稀释标本（即先加200ul标本稀释液于板孔中，再分别加入2ul待检血清于各孔中混匀）。设阴、阳性对照（各100ul）及空白对照（加100ul标本稀释液）各一孔。轻拍混匀。

3． 37℃温育30分钟。甩去孔内液体，用洗涤液洗板4次并在吸水纸上拍干。

4． 加酶结合物：每孔2滴，混匀后置37℃温育30分钟。同上法洗涤5次并拍干。

5． 显色：每孔加显色剂A、B各一滴，轻拍混匀（或震荡器混匀）后置37℃10分钟。

[结果判断]

1．目测：在白色背景下观察各孔显**况，兰色者为阳性，无色者为阴性。

2．酶标仪测定：每孔加终止液一滴，混匀后在450nm下测定各孔O.D值。

① P/N=标本O.D值/阴性对照O.D值。

② P/N≥2.1为阳性；

③ 1.5≤P/N<2.1为可疑标本; P/N<1.5为阴 性。

④ 阴性对照(NC)小于0.10时以0.10计, 大于0.1小于0.21时以实际O.D值计算;若大于0.21时,实验可能出现了较大误差,需重复实验。

⑤ 阳性对照(PC)值通常≥0.4,实验成立,否则需重做。

[注意事项]

1． 微孔板须密封防潮，从冷藏环境中取出时，应置室温平衡至潮气尽干后方可开启使用，余者封存置2-8℃。

2． 滴加试剂前应将液体翻转数次混匀，滴加时保持瓶身垂直。

3． 洗涤时每孔均须加满，防止孔内有游离酶不能洗净。

4． 试剂置2-8℃存放，不能冻结，有效期10个月。

5． 避免用溶血、混浊或脂血标本。

6． 最好用新鲜标本，如需保存，可于2-8℃冷藏48小时或-20℃冻存4周（样本应避光）。